細胞生物學平臺

脂肪干細胞分離培養
 

大鼠脂肪干細胞的分離
  將手術切取的大鼠脂肪組織盡量剪碎后移至離心管，其余步驟與人脂肪干細胞的分離一致。
  經手術切除獲得的大鼠皮下脂肪組織消化后原代培養24 h，肉眼觀察會發現培養瓶底部貼附著一層網狀薄膜，輕輕搖晃培養瓶可使這層網狀薄膜從瓶壁上脫落，鏡下觀 察發現大部分細胞都附著于這層膜上，通過吸脂術獲取的人脂肪組織消化后則無此現象。增加膠原酶的量和消化時間也無法避免，取材時的毛細血管或脂肪間結締組織未被完全消化，穿過細胞篩進入了培養瓶并沉淀于瓶底部形成的。膠原蛋白酶雖然可以特異性水解膠原蛋白的三維螺旋結構，但不會損傷其他蛋白質。處理方法是37 ℃下用胰蛋白酶 消化5 min。然后利用40μm的細胞篩過濾后傳代。 根據作者的經驗，每毫升手術切除的大鼠脂肪可分離基質血管成分細胞約1.81*10⁶個。原代培養2.24*10⁷個大鼠基質血管成分細胞，40 h后傳代時約剩余 6.2×10^6個細胞，細胞剩余率27%。

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