藥效學實驗中心

通便功能動物實驗評價方法

1 實驗項目

1.1小腸運動實驗

1.1.1實驗原理：

經口灌胃給予造模藥物復方地芬諾酯或洛哌丁胺，建立小鼠小腸蠕動抑制模型，計算一定時間內小腸的墨汁推進率，來判斷模型小鼠胃腸蠕動功能。

1.1.2實驗方法

選用成年健康雄性小鼠，體重在18-22g，每組10-15只。實驗設三個劑量組，一個陰性對照組，一個模型對照組，必要時設陽性對照組。陰性對照組和模型對照組同樣途徑給溶劑。受試樣品連續給予時間7天，各組小鼠禁食不禁水 20小時。模型對照組和三個劑量組灌胃給予復方地芬諾酯5-6mg/kg BW，陰性對照組給蒸餾水。給復方地芬諾酯或洛哌丁胺0.5小時后，劑量組灌胃給予含相應濃度受試樣品的墨汁，陰性和模型對照組給墨汁灌胃。25分鐘后立即脫頸椎處死動物，打開腸腔分離腸系膜，剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將小腸拉成直線，測量腸管長度為“小腸總長度”，從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進長度”。

1.2排便時間、糞便粒數和糞便重量的測定

1.2.1原理：

經口灌胃給予造模藥物復方地芬諾酯或洛哌丁胺，建立小鼠便秘模型，測定小鼠首粒排黑便排便時間、5或6小時內排便粒數和排便重量，來反映模型小鼠的排便情況。

1.2.2實驗方法

選用成年健康雄性小鼠，體重在18-22g，每組10-15只。實驗設三個劑量組，一個陰性對照組和一個模型對照組，必要時設陽性對照組?？瞻讓φ战M和模型對照組同樣途徑給溶劑。受試樣品連續給予時間7天，各組小鼠禁食不禁水 20小時。陰性對照組給蒸餾水，模型對照組和三個劑量組灌胃給予復方地芬諾酯10-12mg/kg BW。給復方地芬諾酯0.5小時后，陰性對照組和模型對照組小鼠用墨汁灌胃，劑量組灌胃給予含相應濃度受試樣品的墨汁，動物單籠飼養，正常飲水進食。從灌墨汁開始，記錄每只動物首粒排黑便時間、5或6小時內排便粒數及重量。

2 實驗原則

2.1 動物實驗和人體試食實驗所列指標均為必做項目。

2.2 實驗中復方地芬諾酯或洛哌丁胺的造模劑量應通過預實驗確定。

2.3 除對便秘模型動物各項必測指標進行觀察外，還應對正常動物進行觀察，不得引起動物明顯腹瀉。

2.4 排便實驗中模型成立的條件為排首粒黑便時間、5或6小時內排糞便重量和糞便粒數與陰性對照組差異均有顯著性。

2.5排便次數的觀察時間實驗前后應保持一致。

3 動物實驗結果判定

五到六小時內排糞便重量和糞便粒數任一項結果陽性，同時小腸運動實驗和排便時間任一項結果陽性，可判定該受試樣品通便功能動物實驗結果陽性。